抗氧化效果的评价方法

2011-07-14 15:44 heyushan

  方法一:抗油脂过氧化力测定

  脂类包括的范围很广,是构成生物膜的主要成分,脂类中的不饱和脂肪酸可以过氧化,脂类过氧化过程中会产生L、LO、LOO-等自由基以及LOOH,这些产物会损伤生物细胞。因此,能够抑制脂类过氧化具有重要的生物学意义。

  A硫氰酸铁法FTC:硫氰酸铁盐(FTC)比色法是基于在酸性条件下,脂质氧化形成的过氧化物可将Fe2+氧化成Fe3+,然后Fe3+与硫氰酸根离子可形成在480-515nm内有最大吸收的红色络合物。通常用500nm处吸光值的高低表示物质抗脂质过氧化的能力,吸光值越小,表明物质的抗脂质过氧化能力越强。

  B硫代巴比妥酸反应物TBARs法:是评价油脂的氧化程度的常用方法。油脂或者亚油酸氧化后的终产物主要是丙二醛,这些过氧化产物与硫代巴比妥酸作用生成有色化合物,该有色化合物在530 nm左右有吸收。

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  方法二:清除2,2一二苯代苦味阱DPPH能力的侧定

  DP是一种早期合成的有机自由基,常用来评估抗氧化物的供氢能力,它在有机溶剂中非常稳定,呈紫色,而且在处有一个特征吸收峰,当遇到自由基清除剂时,DPPH的孤对电子被配对而使其退色,也就是在最大吸收波长处的吸光值变小。因此,可通过测定吸光值的变化来评价样品对DPPH自由基的清除效果

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  方法三:还原能力的测定

  还原力的测定是检验样品是否是良好的电子供体的方法,还原力强的样品应该是良好的电子供应者,它供应的电子不仅能使Fe3+还原为Fe2+,也可以与自由基反应。还原力的测定是用来评价抗氧化剂活性的常用方法。

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  方法四:抑制 LOX酶实验

  脂肪氧化酶LOX在植物中分布广泛是一种非血红素铁蛋白,分子量为90一100KD。这种酶蛋白有多个多肤链组成,含有三价铁离子金属辅基则有活性,而包含二价铁离子的金属辅基则缺乏活性。在生物体内的主要作用是,专一催化含有顺,顺一戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸的加氧反应,生成具有共扼双键的多元不饱和脂肪酸的氢过氧化物。在生物体内的主耍底物是甘油脂类〔如磷脂)释放的游离不饱和脂肪酸,其中动物体内的主要底物是花生四烯酸,植物体内的主要底物是亚油酸和亚麻酸,主要产物为过氧羚基型脂肪酸。

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